光度計是由光源、單色器、吸收池、檢測器和信號處理器等部件組成。是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段??梢栽谧贤饪梢姽鈪^(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
光度計是實驗室檢測核酸或者蛋白樣品濃度常用的工具之一。儀器使用頻繁,但甚少見到有人維護(hù)。其實,保持光度計清潔、無污染是成功操作的關(guān)鍵。
光度計的使用方法:
1、接通電源,打開儀器開關(guān),掀開樣品室暗箱蓋,預(yù)熱10分鐘。
2、將靈敏度開關(guān)調(diào)至"1"檔(若零點調(diào)節(jié)器調(diào)不到"0"檔時,需選用較高檔。)
3、根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動波長選擇鈕。
4、將空白液及測定液分別倒入比色杯3/4處,用擦鏡紙擦清外壁,放入樣品室內(nèi),使空白管對準(zhǔn)光路。
5、在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)器,使讀數(shù)盤指針指向t=0處。
6、蓋上暗箱蓋,調(diào)節(jié)"100"調(diào)節(jié)器,使空白管的t=100,指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿,分別讀出測定管的光密度值,并記錄。
7、比色完畢,關(guān)上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。